ساخت وکتور minicircle حاوی ژن مقاومت به پورومایسین

نویسندگان

نفیسه صانعی عطاآبادی

nafiseh sanei ata-abadi کامران قائدی

ghaedi nafiseh sanei ata-abadi, kamran کیانوش درمیانی

kianoush dormiani یحیی خزایی

yahya khazaei محبوبه فروزان فر

چکیده

وجود توالی های باکتریایی در پلاسمید های معمول علاوه بر ایجاد مشکلات ایمنی سبب کاهش بیان ژن می گردد. وکتورهای minicircle وکتورهایی خارج کروموزومی وفاقد توالی های باکتریایی می باشند. این وکتور ها به واسطه یک نوترکیبی درون مولکولی توسط یک ریکامبیناز از پلاسمید والدی ساخته می شوند. در این مطالعه یک حامل minicircle حاوی ژن مقاومت به پورومایسین ساخته شد. به این منظور ابتدا یک پلاسمید والدی ساخته شد که حاوی ژن اینتگرازфc31 قابل کنترل با پروموتر قابل القای arabad ، توالی های attp وattb اختصاصی ژن اینتگرازфc31 در دو طرف ژن puro و توالی های لازم برای بیان آن ، یک شاخص انتخابی برای غربالگری در باکتری ها وتوالی شروع برای همانندسازی در باکتری می باشد. با القای بیان اینتگرازتوسط آرابینوز، فرآیند نوترکیبی توسط اینتگراز صورت گرفت و minicircle حاوی ژن puro در باکتریe.coli ساخته شد. با توجه به بیان بالا وعدم الحاق وکتور ها ی minicircle در ژنوم، وکتورminicircle تولید شده در این مطالعه ابزار مناسبی برای غربالگری سلول ها به منظور ایجاد رده های سلولی پایدار می باشد.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

ساخت وکتور minicircle حامل ژن مقاومت به پورومایسین

پلاسمیدها انواعی از ناقلهای غیر ویروسی هستند که برای انتقال ژن بکار می روند. پلاسمید های معمول که در ژن درمانی استفاده می شوند، از دو قسمت تشکیل شده اند که عبارتند از توالی های باکتریایی و واحد نسخه برداری که حاوی ژن مورد نظر و توالی های لازم برای بیان آن در سلول های یوکاریوتی می باشد. توالی های باکتریایی از جمله مبدا همانندسازی باکتریایی و ژن مقاومت به آنتی بیوتیک برای تکثیر و غربالگری در باکت...

15 صفحه اول

طراحی و ساخت وکتور پلاستیدی حاوی ژن badh

انتقال ژن های خارجی به کلروپلاست گیاهان دارای مزایای زیادی است که می توان به بیان بالای پروتئین های خارجی و عدم آلودگی زیست محیطی اشاره کرد. با توجه به توالی یابی ژنوم پلاستید کاهو می توان قطعات همولوگ زیادی را برای طراحی وکتور به منظور تولید پروتئین های نوترکیب در این گیاه استفاده کرد. در این پژوهش از قطعات همولوگ rbcl-accd و پروموتر prrn و ترمیناتور tpsba برای ژن هدف همراه قطعه ژنی badh مقاوم...

متن کامل

طراحی و ساخت کلونینگ وکتور حاوی قطعه فیوژنی دو ژن hspX و tb 10.4 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس

هدف: سل از مهم‌ترین بیماری‌های عفونی و از شایع‌ترین علل مرگ و میر در دنیا خصوصاً در کشورهای در حال توسعه می‌باشد که توسط مایکوباکتریوم توبرکلوزیس ایجاد می‌شود. طراحی و ساخت واکسن های جدید بر علیه مایکوباکتریوم توبرکلوزیس تنها راه موثر در پیشگیری و کنترل آن می‌باشد. هدف از این مطالعه طراحی و ساخت  کلونینگ وکتور با استفاده از فیوژن ادغام دو ژن hspX و tb10.4 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس می‌باشد. مواد ...

متن کامل

طراحی، ساخت و بیان وکتور نوترکیب ژن نوکلئوپروتیین ویروس هاری

Background: Rabies is an acute encephalitis that causes more than 60,000 deaths worldwide. The only way to save individuals bitten by a rabies-infected animal is the timely use of effective vaccines. Treatment with new generation vaccines is expensive. Therefore, there is a global movement towards the production of less expensive vaccines which retain and improve upon the quality and effectiven...

متن کامل

مروری بر وکتور های minicircle

پلاسمید هایاستاندارد از دو قسمت توالی های باکتریایی و واحد بیانییوکاریوتی تشکیل می شوند. مطالعات اخیر نشان داده اند که وجود توالی هایباکتریایی در پلاسمید علاوه بر ایجاد مشکلات ایمنی، با گذشت زمان سبب کاهش بیان ژن خارجی می گردد. بر این اساس وکتور های minicircle ساخته شدند. وکتور های minicircle فاقد توالی های باکتریایی بوده و فقط حاوی واحد بیانی یوکاریوتی (توالی کدکننده ژن مورد نظر به همراه پرومو...

متن کامل

ساخت وکتور بیانی pcDNA3.1-FSHβ به منظور انتقال ژن زیر‌واحد FSHβ به سلول لاین پستان‌داران

  سابقه و هدف: هورمون محرک فولیکولی (Follicle stimulating hormone, FSH)، یکی از هورمون‌های گلیکوپروتئینی هیپوفیز است که از دو زیر‌واحد آلفا و بتا تشکیل شده است. زیرواحد بتا حاوی 111 اسیدآمینه و یک سیگنال پپتید 18 اسیدآمینه‌ای و مسئول فعالیت بیولوژیکی هورمون می‌باشد. هدف از این مطالعه ساخت وکتور بیانی pcDNA3.1-FSHβ به منظور انتقال ژن زیر‌واحد FSHβ به سلول لاین پستانداران بود. مواد و روش‌...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
genetics in the 3rd millennium

جلد ۹، شماره ۴، صفحات ۲۵۶۶-۲۵۷۳

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023